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细胞计数仪的操作流程,你了解多少?

发表时间:2022-09-27  |  点击率:80
  细胞计数仪的操作流程,你了解多少?
  细胞计数是细胞培养研究中的一项基本研究,它是了解培养细胞生长状态,测定培养基、血清和药物等物质生物作用的重要手段。细胞计数仪能够在1min以内对培养的细胞分析,并获得细胞活细胞和死细胞浓度、细胞平均体积大小、生存能力、细胞大小或体积分布曲线图。细胞计数器还有用于藻类,微生物等直径细胞计数器范围内的生物。相对血球计数板法,细胞计数仪计数更加精确,快速便捷,误差更小。
  细胞计数仪的操作流程:
  1、用上述胰蛋白酶/EDTA使贴壁和半贴壁细胞悬浮,并将其重悬于至少相当于胰蛋白酶体积的一定体积的新鲜培养基中。对于成团生长的细胞,离心后在小体积中重悬,轻轻移液以吸碎成团。
  2、在无菌条件下,移取100-200μL细胞悬液。
  3、加入等体积的台盼蓝(稀释倍数=2),轻轻移液混匀。
  4、清洁血细胞计数器。
  5、用水或哈气湿润盖玻片。轻压盖玻片,使其在腔室内来回滑动,直到出现牛顿折射环(牛顿折射环在盖玻片下视为彩虹状环)。
  6、用细胞悬液(约5-10μl)填充腔室两侧,用x20放大倍数在倒置相差显微镜下进行观察。
  7、计数活细胞(亮细胞)和非活细胞(染成蓝色)的数量。理想情况下应计数>100个细胞,以提高细胞计数的准确性。请注意获得>100细胞计数的方格数。
  8、使用下面的公式计算活细胞和非活细胞的浓度以及活细胞的百分比。
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