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PCR仪使用时考虑的因素有哪些

发表时间:2021-12-24  |  点击率:32
  PCR仪使用时考虑的因素有哪些
  1、样本管的种类:
  现在主要有0.2ml和0.5ml两种,使用0.5ml PCR管的人员已经很少了,一是0.5ml PCR专用的薄壁管很少见,二是如果想要较大体积的PCR产物,可以通过多分几个0.2ml PCR管来实现。 除非经常需要较大体积的PCR产物,否则可以不必考虑0.5ml型的PCR仪。
  2、样本容量:
  种类很多,0.2ml的有96孔和48孔,0.5ml的有60孔和30孔,384孔等,当然还有一些其他组合:如0.2ml的48孔与0.5ml的30孔组合。
  3、温度梯度功能:
  即不同列或不同行之间温度可以为不同的温度。这一功能对于固定PCR程序的检验人员来讲,可能用处不大,但对于经常进行不同基因扩增的研究人员来讲可以说是必须的。
  4、计算控温与模块控温:
  模块控温是早期PCR仪所使用的控温方式,即所设定的温度为加热模块的温度,在变温过程中,快要达到目标温度时,PCR仪将升降温速率降低,让模块的温度慢慢接近目的温度,而不发生过冲。计算控温也称为管式控温,即考虑的是PCR反应管中的温度,为了加快使反应管中温度达到目的温度,模块温度先过冲,然后在反应管中温度接近达到目的温度时调节到合适的温度,调节方式是通过理论计算与实验相结合而来的,与反应管中的反应液的体积有关,因此计算控温模式都需要实验人员输入反应液的体积。计算控温模式已经是普遍采用的方式了。
  5、断电保护功能:
  这也是一个很有用的功能,特别是在中小城市,经常会发生短时间停电、保险丝融断以及空气开关跳闸等现象,如果没有这一功能,开机后不能自动接下来进行实验,往往会影响工作。
  6、热盖功能:
  热盖功能是各个厂家都有的,如果没有,怕是没人要了。热盖也分为可调式热盖和不可调式热盖。可调式热盖中又有力矩式可调热盖,主要解决在压紧热盖时用力过大及过小的问题。
  7、软件功能:
  仪器软件功能方面当然都可以设置PCR程序了,只是方便不方便的问题,用熟了便方便了,差别都不大。只是有的显示屏大些,可以画出一个温度变化曲线来,但大都是模拟的,意义也不大,只是好看些。还有如每个循环增减温度以及增减时间的功能,好像多数仪器都有,如有这方面的需要则要注意一下。
  8、使用寿命:
  仪器的使用寿命,如果不考虑维修的成本,则主要与半导体制冷片的寿命相关。
  9、电源可靠性:
  这是一个很重要的因素,但也是用户有所忽视一个因素。因为绝大多数的仪器出现故障都是由于电源问题或是电源问题造成的。由于PCR仪是一个变温仪器,也是一个使用时间长并且经常连续使用的仪器,有些用户一天使用达20小时左右。电源出问题的原因是多方面的,一是潮气和灰尘,在国内,北方的灰尘很大,南方的潮气很重。有时灰尘大到有些PCR仪打开后看不到电子元件了,电路板散热不好,造成电源部分烧坏。有时潮气大到仪器内可以流出水来,造成电路板短路,电源部分烧坏。
  10、维修成本与保修时间:
  这是一个很实际的问题,大多数PCR仪都只保修一年,有些在用户的要求下会增加保修时间。一般仪器的保修费用为仪器价格的8-12%每年,所以保修也就是钱。一般来讲进口仪器的维修成本会比较高,一是配件成本本身就高,二是运输费用及进口关税等。另外进口仪器厂家一般都不允许进行原件级的维修,是出于利润以及质量两方面的考虑,其实国外元件级维修的成本也许比更换电路板成本还高。因此只有国内人员才进行元件级的维修,国内人力成本低,水平也高些。
  11、温度的准确性与精确性:
  准确性与精确性都是有标准定义的。精确性也称精确度(precision),指调查或试验中同一指标或性状的重复观测值彼此接近程度的大小。就PCR仪来讲,准确性指的是设定温度与实际温度差别的大小,而精确性则是指不同孔间温度的差别。一般来讲,加热模块的温度的准确性和精确性都要好些。
  12、升降温速率:
  这是很多的购买者关心的问题,它可能会影响PCR反应时间。但在这个问题上有些理解上的差别。一般仪器所标注都是大升降温速率,而用户所理解的是温度差与升降温所用时间比值。这是有些用户发现升降温速率达不到仪器所标注的速率的原因。用户所关心的是对用户来讲有意义的。过度的升降温速率对于用户来讲意义不大,因为容易引发温度过冲,并需要较长时间来调整。
  13 、其他:
  如噪音大小、外观等也是需要考虑的。噪音就不必讲了,当然是越小越好。外观上各有所好,也不好评说,但在国内还需要考虑的有是否显脏。
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